I. Rasterauswahl
Bei der Zählung von Urinsedimenten werden typischerweise vier große Eckraster oder ein großes zentrales Raster verwendet (angepasst an die Anzahl der Zellen/Zylinder: vier Eckraster für eine große Anzahl von Zellen, ein großes zentrales Raster für eine kleine Anzahl von Zellen).
Probenvorbereitung und Vorverarbeitung der Zählung
Exemplarsammlung:
Es wird üblicherweise frischer Morgenurin (hohe Konzentration, hohe Positivrate) oder Gelegenheitsurin gesammelt, wobei 10 ml Urin in ein Zentrifugenröhrchen gegeben werden.
Zentrifugationskonzentration: Zentrifugieren Sie 5 Minuten lang bei 1500 U/min gemäß den Standardarbeitsanweisungen.
Überstand verwerfen: Den Überstand vorsichtig verwerfen und die unteren 0,2 ml Sediment zurückhalten (50-fache Konzentration, Konzentrationsfaktor = ursprüngliches Urinvolumen / Sedimentvolumen = 10/0,2 = 50).
Sediment resuspendieren: Schütteln Sie das Zentrifugenröhrchen vorsichtig, um das Sediment gleichmäßig zu verteilen und eine Zellaggregation zu vermeiden.
Zählverfahren: Probenzugabe: Ziehen Sie mit einer Mikropipette das gemischte Urinsediment auf und geben Sie es an den Rand des Deckglases in der Zählkammer (die Zählkammer wird durch Kapillarwirkung gefüllt). Vermeiden Sie dabei Luftblasen (Luftblasen führen zu ungenauen Volumenwerten im Zählbereich).
Absetzen: Stellen Sie die Zählkammer auf den Tisch und lassen Sie sie 1-2 Minuten stehen, damit sich die gebildeten Elemente am Boden der Zählkammer absetzen können. Dadurch werden Fehler vermieden, die durch schwebende Zellen während des Zählens entstehen könnten.
Mikroskopische Beobachtung: Verwenden Sie ein Mikroskop mit niedriger Vergrößerung (10×), um die Zählkammer zu lokalisieren, und verwenden Sie dann eine hohe Vergrößerung (40×) zum Zählen.
Zählprinzipien: Beachten Sie das Prinzip „oben zählen, aber nicht unten; links zählen, aber nicht rechts“ (zählen Sie nur die Zellen an den angrenzenden Seiten und in den Ecken der Linien), um Doppelzählungen oder Auslassungen zu vermeiden. Auswahl des Zählbereichs: Bei Komponenten mit einer großen Anzahl roter Blutkörperchen, weißer Blutkörperchen usw.: Zählen Sie alle Zielkomponenten in den vier Eckquadraten.
Bei Bauteilen mit einer geringen Anzahl von Gussteilen usw.: Zählen Sie alle Zielbauteile in allen neun großen Quadraten der Zählkammer.
Kernberechnungsmethode: Urinsedimentzählung
Die Berechnung rechnet die „tatsächliche Menge innerhalb des Zählbereichs“ in die „ursprüngliche Konzentration der Komponenten im Urin“ um. Die Formel erfordert die Berücksichtigung des Volumens des Zählbereichs und des Probenkonzentrationsfaktors.
Allgemeine Berechnungsformel:
Konkretes Berechnungsbeispiel (Beispiel: Zählen von 4 Eckzellen):
Konzentration der Urinbestandteile (Zellen/μL) = (Gesamtzahl der Zählungen × Konzentrationsfaktor) / Gesamtvolumen des Zählbereichs (μL)
1. Parameter bestimmen:
Zählbereich: 4 große Zellen, Volumen jeder großen Zelle = 0,1 μL, daher Gesamtvolumen der 4 großen Zellen = 4 × 0,1 = 0,4 μL.
Konzentrationsfaktor: Nach dem Zentrifugieren von 10 ml Urin werden 0,2 ml Sediment zurückgehalten, Konzentrationsfaktor = 10/0,2 = 50.
Tatsächliche Zählung: Es wird angenommen, dass in den 4 Eckzellen insgesamt 80 weiße Blutkörperchen gezählt werden.
Konzentration der weißen Blutkörperchen (Zellen/μL) = 80 × 50 / 0,4 = 10000 Zellen/μL
Fallbeispiel mit geringerer Zellenzahl (Zählen von 9 großen Zellen)
Wenn 9 große Zellen gezählt werden (z. B. bei der Ausgusszählung), dann ist das Gesamtvolumen des Zählbereichs = 9 × 0,1 = 0,9 μL. Die anderen Parameter bleiben unverändert, und die Formel kann angewendet werden.
Neun Zählzonen (jeweils mit einem Flüssigkeitsvolumen von 0,1 μL), jede Zone misst 3 mm x 3 mm und hat eine Tiefe von 100 μm. Die Gitterlinienbreite beträgt 15 μm (±1 μm).